- · 《建筑材料学报》期刊栏[04/29]
- · 《建筑材料学报》数据库[04/29]
- · 《建筑材料学报》投稿方[04/29]
- · 建筑材料学报版面费是多[04/29]
一、来稿必须是作者独立取得的原创性学术研究成果，来稿的文字复制比（相似度或重复率）必须低于用稿标准，引用部分文字的要在参考文献中注明；署名和作者单位无误，未曾以任何形式用任何文种在国内外公开发表过；未一稿多投。 二、来稿除文中特别加以标注和致谢之外，不侵犯任何版权或损害第三方的任何其他权利。如果20天后未收到本刊的录用通知，可自行处理(双方另有约定的除外)。 三、来稿经审阅通过，编辑部会将修改意见反馈给您，您应在收到通知7天内提交修改稿。作者享有引用和复制该文的权利及著作权法的其它权利。 四、一般来说，4500字（电脑WORD统计，图表另计）以下的文章，不能说清问题，很难保证学术质量，本刊恕不受理。 五、论文格式及要素：标题、作者、工作单位全称(院系处室)、摘要、关键词、正文、注释、参考文献(遵从国家标准：GB\T7714-2005，点击查看参考文献格式示例)、作者简介(100字内)、联系方式(通信地址、邮编、电话、电子信箱)。 六、处理流程：（1） 通过电子邮件将稿件发到我刊唯一投稿信箱（2）我刊初审周期为2－3个工作日，请在投稿3天后查看您的邮箱，收阅我们的审稿回复或用稿通知；若30天内没有收到我们的回复，稿件可自行处理。（3）按用稿通知上的要求办理相关手续后，稿件将进入出版程序。（4） 杂志出刊后，我们会按照您提供的地址免费奉寄样刊。 七、凡向文教资料杂志社投稿者均被视为接受如下声明：（1）稿件必须是作者本人独立完成的，属原创作品（包括翻译），杜绝抄袭行为，严禁学术腐败现象，严格学术不端检测，如发现系抄袭作品并由此引起的一切责任均由作者本人承担，本刊不承担任何民事连带责任。（2）本刊发表的所有文章，除另有说明外，只代表作者本人的观点，不代表本刊观点。由此引发的任何纠纷和争议本刊不受任何牵连。（3）本刊拥有自主编辑权，但仅限于不违背作者原意的技术性调整。如必须进行重大改动的，编辑部有义务告知作者，或由作者授权编辑修改，或提出意见由作者自己修改。（4）作品在《文教资料》发表后，作者同意其电子版同时发布在文教资料杂志社官方网上。（5）作者同意将其拥有的对其论文的汇编权、翻译权、印刷版和电子版的复制权、网络传播权、发行权等权利在世界范围内无限期转让给《文教资料》杂志社。本刊在与国内外文献数据库或检索系统进行交流合作时，不再征询作者意见，并且不再支付稿酬。 九、特别欢迎用电子文档投稿，或邮寄编辑部,勿邮寄私人，以免延误稿件处理时间。
用于生物人工肝反应器构建三维支架材料的选择
作者:网站采编关键词:
摘要：0 引言 Introduction 肝功能衰竭是各种严重肝病的终末期表现，肝移植是肝功能衰竭治疗的最有效手段，但供肝来源紧缺限制了肝移植的广泛使用。以培养肝细胞为材料的体外生物人工肝支
0 引言 Introduction
肝功能衰竭是各种严重肝病的终末期表现，肝移植是肝功能衰竭治疗的最有效手段，但供肝来源紧缺限制了肝移植的广泛使用。以培养肝细胞为材料的体外生物人工肝支持系统，有望为肝功能衰竭患者等待肝移植或通过自身肝再生恢复提供过渡的“桥梁”[1-3]。生物人工肝的3 大要素是生物反应器、肝细胞和体外装置，其中生物反应器是生物人工肝的核心部分，其性能直接关系到生物人工肝支持治疗的效果和作用[4-6]。中空纤维型生物反应器具备良好的免疫阻隔作用，是目前应用最广泛的生物反应器[7-8]，但肝细胞在这种反应器内分布不均匀，易沉积底部，难以提供三维肝细胞培养微环境[9-10]。以往研究试图利用中空纤维为肝细胞提供三维支持，研制出中空纤维三维编织型、氧合中空纤维型、螺旋编织纤维型等生物反应器[11-15]，虽然能够部分改善肝细胞在生物反应器内的分布，但仍难以使肝细胞分布均匀，不能为肝细胞培养提供令人满意的三维微环境，无法提高生物反应器的肝支持效果。三维支架材料是改善肝细胞培养三维微环境的理想方法，在三维支架材料内培养的肝细胞能够形成具有较强肝细胞功能的肝组织，将三维支架材料应用于中空纤维型生物反应器的设计与构建中，有可能使肝细胞在生物反应器内分布更均匀，为生物反应器的组织化培养提供可能[16]。实验对比分析多种三维支架材料的孔隙率、孔径、物理特性等结构特点，观察其与肝细胞的相容性，并进一步优化培养条件，以探讨将三维支架材料用于构建人工肝生物反应器的可行性。
1 材料和方法 Materials and methods
1.1 设计 细胞学体外实验。
1.2 时间及地点 实验于2006 年12 月至2008 年12 月在第三军医大学西南医院感染科实验室完成。
1.3 材料 三维多孔支架材料壳聚糖、聚乳酸-聚羟乙酸酯、聚氨酯分别由解放军军事科学院卫生装备研究所、山东生物材料研究所、四川大学高分子科学与工程学院提供。L02 细胞(即HL-7702人肝细胞)来源于正常人肝组织的人肝细胞株，购自中国科学院上海细胞生物学研究所。
1.3.1 实验用主要试剂 鼠尾胶原、二乙酸荧光素(FDA)、四甲基偶氮唑盐(MTT)、DMSO(美国Sigma)；牛纤维蛋白原和牛凝血酶(北京库尔科技有限公司)；RPMI-1640 培养基、新生小牛血清、胰酶、PBS(美国Gibco)；人白蛋白ELISA 检测试剂盒(美国Bethyl Lab 公司)。
1.3.2 实验用主要仪器 倒置相差显微镜和荧光显微镜(IX70型，日本Olympus 公司)；酶标仪(美国Thermo Fisher 公司)；细胞培养箱(德国Nuaire 公司)；自动生化分析仪(日本HITACH 公司)。
1.4 实验方法
1.4.1 三维支架材料的结构观察和微孔直径测定 将三维多孔支架材料壳聚糖、聚乳酸-聚羟乙酸酯、聚氨酯分别手工裁剪成厚度0.2 cm 的薄片，分别在倒置相差显微镜下观察。随机选取10 个视野，利用标尺测定支架材料每个微孔的直径，计算平均值。
1.4.2 支架材料孔隙率的测定 将3 种支架材料裁剪成1.0 cm×1.0 cm×1.0 cm 的立方体即1.0 mL 体积，每种材料6 块。将立方体材料置双蒸水内，用负压泵排空支架材料内的空气；取出支架材料，5 000 r/min 离心5 min，收集支架材料内的液体，测定支架材料内的液体体积。计算孔隙率，孔隙率(%)=支架材料内液体体积(μL)/支架材料体积×100%。
1.4.3 支架材料内细胞接种率测定 将聚氨酯、壳聚糖、聚乳酸-聚羟乙酸酯3 种支架材料裁剪成1.0 cm×1.0 cm×1.0 cm 的立方形即1.0 mL 体积，各6 块，用60Co 照射消毒后备用。胰酶消化培养的L02 细胞，用含体积分数10%新生小牛血清的RPMI-1640 培养液制成1×109L-1的细胞悬液，将1 mL 细胞悬液分别接种至3 种支架材料上，尽量排空支架内的气泡，置培养板内在细胞培养箱培养。培养4 h 后，将支架材料取出，收集培养板内的细胞，并用血细胞计数板计数未接种上的剩余细胞数，计算细胞接种率，细胞接种率(%)=(接种细胞总数-剩余细胞数)/接种细胞总数×100%。
1.4.4 支架材料的处理和细胞接种 将3 种支架材料裁剪成24 孔培养板孔大小，厚0.5 cm，铺在12 孔培养板孔内；PBS漂洗3 次，烤干后用60Co 照射消毒，使用前用培养液漂洗3 次。将对数生长期的L02 细胞用胰酶消化，用含体积分数10%新生小牛血清的RPMI-1640 培养液配制成4×107L-1的细胞悬液，每孔支架材料内接种细胞悬液0.5 mL，置入37 ℃、体积分数5%CO2细胞培养箱内培养4 h 后，每孔加含体积分数10% 新生小牛血清的RPMI-1640 培养液1.5 mL，继续在细胞培养箱培养。培养24 h 后进行细胞活性和乳酸脱氢酶漏出量检测，培养3 d 后进行白蛋白合成量检测。通过实验结果选择物理特性和肝细胞相容性更好的支架材料进行培养条件的优化。
文章来源：《建筑材料学报》 网址: http://www.jzclxb.cn/qikandaodu/2021/0624/555.html